Production et purification de Lentivirus et Rétrovirus
Le système de production des lentivecteurs utilisé sur la plateforme PVM est basé sur la 2ᵉ génération dérivée de HIV-1, avec des particules pseudotypées avec la glycoprotéine d’enveloppe VSV-G. La production de rétrovirus murins est également possible à la demande.
Prestation de base proposée
- Production de particules virales par triple transfection dans des cellules 293T
- Purification et concentration (100×) par ultracentrifugation sur gradient de sucrose
- Titration physique : ELISA p24
- Titration infectieuse si le vecteur contient un gène rapporteur fluorescent sous un promoteur ubiquitaire (analyse par cytométrie après transduction)
Formats de production disponibles
- Grande échelle : 1 virus → 1400 µL
- Petite échelle : 2 virus différents → 700 µL/virus
Prestations optionnelles sur demande
- Production de surnageants viraux non concentrés
- Méthodes alternatives de concentration : précipitation au PEG ou filtration
- Production de vecteurs dérivés des rétrovirus murins MuLV pseudotypés VSV-G
À fournir par l’utilisateur
- Le plasmide lentiviral ou rétroviral contenant le matériel génétique à transférer (quantité selon le format choisi)
- La carte du plasmide
- La fiche de demande de production complétée
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